三維膠原凝膠熒光底物｜FITC標(biāo)記II型膠原用于膠原酶活性定量研究

簡(jiǎn)介：

骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、腫瘤侵襲等科研方向中，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP，膠原酶）介導(dǎo) II 型膠原降解是核心病理過程。傳統(tǒng)同位素標(biāo)記膠原操作危險(xiǎn)、普通熒光底物缺乏天然膠原三維結(jié)構(gòu)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體內(nèi)真實(shí)降解規(guī)律偏差大。

Chondrex #4010 FITC 標(biāo)記牛 II 型膠原，以天然關(guān)節(jié)軟骨膠原為原料，可構(gòu)建仿生三維復(fù)合凝膠，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞水平膠原酶活性直觀、定量檢測(cè)，是軟骨損傷、基質(zhì)重塑機(jī)制研究專用熒光底物。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1、三維仿生膠原凝膠構(gòu)建

可與 Chondrex I 型膠原（貨號(hào) 1202/1062）混合制備復(fù)合水凝膠：I 型膠原提供支架機(jī)械穩(wěn)定性，II 型膠原還原軟骨生化信號(hào)，形成仿生異源膠原纖維。支持兩種造模方式：

1）細(xì)胞懸液直接混膠包埋，構(gòu)建三維細(xì)胞培養(yǎng)模型；

2）凝膠成型后接種細(xì)胞，用于細(xì)胞侵襲、基質(zhì)降解動(dòng)態(tài)觀測(cè)。

2、細(xì)胞源性膠原酶活性定量檢測(cè)（核心用途）

1）細(xì)胞在 FITC 標(biāo)記膠原凝膠中培養(yǎng)，細(xì)胞分泌膠原酶切割底物，釋放帶熒光的膠原片段至培養(yǎng)液；

2）收集上清檢測(cè)熒光強(qiáng)度（激發(fā) 490 nm，發(fā)射 520 nm），熒光值與膠原酶活力正相關(guān)；

3）采用細(xì)菌膠原酶（#30141）降解凝膠作為 100% 熒光參照，計(jì)算膠原降解速率，精準(zhǔn)評(píng)估 MMP 活性、酶抑制劑藥效。

3、適配研究方向

1）骨關(guān)節(jié)疾病：OA 軟骨細(xì)胞損傷、CIA 模型滑膜膠原酶功能、軟骨保護(hù)藥物篩選；

2）腫瘤生物學(xué)：腫瘤細(xì)胞侵襲、基質(zhì)金屬蛋白酶分泌機(jī)制；

3）組織工程：三維軟骨支架降解特性、種子細(xì)胞基質(zhì)重塑能力；

4）酶學(xué)基礎(chǔ)：膠原酶切割動(dòng)力學(xué)、蛋白酶底物特異性研究。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1.天然軟骨來(lái)源，純度＞95%（SDS-PAGE 驗(yàn)證）

原料取自牛關(guān)節(jié)軟骨，完整保留 II 型膠原天然三螺旋構(gòu)象，底物特異性貼合體內(nèi)酶切特征。

2.精準(zhǔn) 1:1 FITC 偶聯(lián)，低背景干擾

膠原與熒光素摩爾比 1:1，生產(chǎn)中去除游離未結(jié)合 FITC，乙醇洗脫本底熒光＜對(duì)照值 0.1%，無(wú)雜信號(hào)干擾定量。

3.凍干粉末，儲(chǔ)存穩(wěn)定、使用便捷

4℃避光保存有效期 1 年；乙酸溶解后即可配膠，無(wú)需復(fù)雜復(fù)性步驟，兼容 24 孔板標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

4.仿生復(fù)合凝膠體系，體外數(shù)據(jù)更貼合體內(nèi)

I/II 型共混凝膠同時(shí)兼顧力學(xué)結(jié)構(gòu)與軟骨特異性信號(hào)，優(yōu)于單一膠原底物，文獻(xiàn)支持可用于細(xì)胞外周蛋白水解功能成像。

5.操作安全無(wú)輻射

替代放射性標(biāo)記膠原，無(wú)同位素防護(hù)、廢液處理流程，普通細(xì)胞房即可開展批量檢測(cè)。

產(chǎn)品信息：

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